临时保藏菌种的方法

农资资讯036

短期保存菌种的方法?

将需要保藏的菌种,接种在适宜的斜面培养基上,菌丝长满斜面时,用硫酸纸包扎棉塞或者用无菌硅胶塞代替棉塞,置4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌种)低温保藏法。由于微生物的新陈代谢活动未停止,试管内培养基易失水变干。因此,低温保藏法的保藏时间较短,不适于长期保藏。每隔3~6个月应转管一次。

临时保藏法温度多少?

临时保藏法:将菌种接种到固体斜面培养基上,然后在适宜的温度下进行培养,当菌落长成之后,将试管放置于冰箱中(4°C)进行保藏即可。甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。

甘油管冷冻保藏法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与菌液充分混匀,使甘油浓度约为10%-30%,于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8:2的甘油-生理盐水,加入新鲜培养的菌体肉汤,混合均匀后至-20℃冰箱保存。

临时保藏菌种的方法,第1张

注意事项

无论采用何种保藏方法,首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏,最好保藏它们的休眠体,如分生孢子、芽孢等。其次,应根据微生物生理、生化特点,人为地创造环境条件,使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。这些人工造成的环境主要是干燥、低温和缺氧,另外,避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂也能有效提高保藏效果。

食用菌菌种保存最常用的方法?

斜面低温保存法

这是最简便最普通的保存方法。即将菌丝生长良好的斜面菌种,置于冰箱内;在4℃左右低温下保存;以后每隔2~3个月转管移接一次。这种保存方法适于大多数食用菌菌种。

为了延长保存时间,试管口处要用塑料薄膜包扎,以防培养基干固。在农村没有冰箱设备的,可把母种试管,用石蜡封口,再用塑料薄膜包封,沉放于清凉的井底保存。

2.液体石蜡保存法

食用菌的菌丝体都可用此法保存,方法简单,只在斜面菌种试管内,注入一层已灭过菌的液体石蜡,注入量以高出斜面1厘米为宜,使菌种与空气隔绝,降低其新陈代谢的活动,然后在棉塞外包以塑料薄膜,直立存放于室内干燥处或低温下保存,一般可保存一年以上。

使用液体石蜡菌种时,只要用接种计从斜面上挑取少许菌体,放在新鲜的培养基上;经过培养,即可应用。原种则重新蜡封,继续保存。

甘油罐藏法和临时宝藏的具体方法?

本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右。

(1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。

(2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右。

(3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时,至菌密度OD600为1.0-1.5。

菌种保藏的依据?

菌种保藏是一切微生物工作的基础,其目的:是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染,并保持其优良性状,以利于生产和科研应用。菌种保藏的原理:是为了达到长期保持菌种的优良特性,核心问题是必须降低菌种变异率,而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程,因此必须创造一种环境,使微生物处于新陈代谢最低水平,生长繁殖不活跃状态。

常用的方法主要有:常规转接斜面低温保藏法,半固体穿刺保藏法,液体石蜡保藏法,含甘油培养物保藏法等,沙土管保藏法。

特殊的有:真空冷冻干燥保藏法和液氮超低温保藏法。