甘油法低温保藏大肠杆菌
常用的是终浓度10-30%的甘油。
由于纯甘油十分粘稠，很难定量，一般配成终浓度50%的水溶液，高压灭菌后室温保存即可。使用时按50%甘油:菌液=1:1混合均匀，然后迅速冻结。
A.先把甘油稀释成50%，然后灭菌
这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦
纯的甘油太粘稠啦，用枪不好吸的B终浓度15%。甘油配成80%的浓度，到时候加800微升菌体，200微升甘油就好。
50%甘油怎么保存
50%的甘油和菌液1比1混匀，直接放入-80度冰箱可长期保存。
为什么制备感受态不要用经过多次转接或储于４℃的培养菌，最好从－70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接
原因是多次转接的细菌，其性状很可能发生改变；而储于4℃的培养菌，细菌仍处在低水平的代谢状态下，细菌容易发生老化或退化，最直接的表现就是细菌状态较差。
所以制作感受态时，最好选择保种较早，保种时状态较好，并且最好是存储在-70℃的深低温冰箱中的菌种为宜。
